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本产品是一种弱阴离子交换磁珠，具有快速的磁响应性、丰富的离子交换能力和极高的蛋白结合能力。离子交换配基为二乙氨乙基（DEAE），该配基在pH3～12的工作范围内仍然能够保持稳定的高蛋白结合能力。与传统柱层析纯化方式相比，Magshow DEAE磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理（如：反复繁琐的离心，费时费力的过滤操作），此外，无需控制流速及柱压，不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说，在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取，且能轻松实现多个样品的平行处理，实现高通量的蛋白纯化。

磁珠粒径范围	30～150μm
离子交换类型	弱阴离子基团
总离子能力	110~170 μmol/mL Gel
蛋白结合量①	≥110mg BSA/mL Gel
保存液	20%乙醇
悬液浓度②	10%(v/v)磁珠悬液
保存温度	2～30℃，建议置于2～8℃可稳定保存2年
工作pH范围	pH3～12

注：
① 蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值；
② 1mL磁珠悬液中含有100μL磁珠。

• 磁响应速度快，减少操作时间。
  
• 磁珠具有良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。
  
• 配基具有良好的物理化学稳定性，提高了实验结果的可靠性及可重。

• 本产品不宜冷冻、干燥或离心操作。冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
  
• 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
  
• 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠2～3次，以去除保存液中乙醇。
  
• 本产品需与磁性分离设备配套使用。
  
• 盐浓度与pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱，客户需自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件，以保证蛋白纯化量和纯度。
  
• 本产品仅供研究使用。

以纯化含BSA蛋白样品为例。

• 磁珠预处理（平衡）：将DEAE磁珠漩涡振荡30 s，使磁珠充分重悬；取一定量的10%（v/v）磁珠悬液置于50mL离心管中。对磁珠悬液进行磁性分离，弃上清液，加入20mL平衡缓冲液洗涤磁珠3次，每次垂直混合2min。
  注：为了获得目标蛋白的最大回收率，实验者需要加入过量的Magshow DEAE磁珠，一般大于蛋白结合量的20%即可。对于含较低丰度目标蛋白的样品中，磁珠对目标蛋白的回收率会有所降低，因此需要继续增大磁珠的用量；
  
• 蛋白吸附：将预处理的磁珠加入含BSA蛋白的样品溶液中，漩涡振荡30 s，置于垂直混合仪混匀30～60min，使样品和磁珠充分接触并吸附，然后进行磁性分离，移弃上清液。
  注：为了更有效率的吸附结合物质，平衡缓冲液最好含有较低的离子强度，选择的pH值应该至少与目标蛋白的等电点相差一个pH单位，选定的盐缓冲液pH波动在0.5 pH以内。目标蛋白与磁珠的吸附时间与蛋白的本身属性有关。
  
• 磁珠洗涤：加入20mL的平衡缓冲液，漩涡振荡重悬磁珠30 s后进行磁性分离，移弃上清液；该操作重复3次。
  
• 蛋白洗脱：在上述完成磁珠洗涤的离心管中加入适量的洗脱液进行蛋白洗脱。用移液器吹打或者涡旋振荡下迅速重悬，然后将离心管置于垂直混合仪混匀10～15min后进行磁性分离，收集上清液至新的离心管中。洗脱方式主要有高盐浓度洗脱（含1～2M的NaCl的平衡缓冲液）和低pH洗脱（选择低于目标蛋白等电点的pH范围即可）两种。
  
• 磁珠再生：一般采用2M NaCl溶液洗涤3～5次，然后用平衡缓冲液进行再平衡处理。磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上，为了保证磁珠的使用效率，建议进行在位清洗（CIP）。
  
• 在位清洗（CIP）：依次采用1.0M NaOH、70%乙醇或30%异丙醇、纯化水洗涤磁珠2次；最后加入20%乙醇重悬磁珠，置于2～8℃保存。

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